Pata Giemsa

De la Wikipedia, enciclopedia liberă.
Salt la navigare Salt la căutare
Imagine microscopică a Plasmodium falciparum cu pata Giemsa.

Pata Giemsa se bazează pe diferențierea constituenților celulari care au o reacție bazică, care fixează colorarea eozinei (acidului) în roșu-portocaliu. Celelalte componente celulare având o reacție acidă se colorează în albastru, produșii de oxidare ai albastrului de metilen fiind albastru (bazic). Pata Giemsa este un sistem care este utilizat și în parazitologie pentru a identifica paraziții. În citogenetică , pe de altă parte, pata Giemsa este utilizată pentru efectuarea bandării cromozomiale .

Etimologie

Numele derivă din Gustav Giemsa , 1867 - 1948, un chimist german, care a dezvoltat procesul în 1904, aducând îmbunătățiri metodei Romanowsky pe atunci folosită. [1]

Utilizări

Este specific pentru grupările fosfat ale ADN-ului și se atașează la regiunile ADN-ului în care există cantități mari de legătură adenină-timină. Colorarea Giemsa este utilizată în banda Giemsa, denumită în mod obișnuit banda G, pentru colorarea cromozomilor și adesea utilizată pentru a crea o cariogramă (harta cromozomilor). Poate identifica aberațiile cromozomiale, cum ar fi translocațiile și rearanjările.

Este folosit pentru colorarea trofozoitului Trichomonas vaginalis , care are o culoare verzuie.

Pata Giemsa este, de asemenea, o pata diferențială, cum ar fi atunci când este combinată cu pata Wright pentru a forma pata Wright-Giemsa. Poate fi folosit pentru a studia aderența bacteriilor patogene la celulele umane. Diferențați culorile pentru celulele umane și bacteriene, respectiv violet și roz. Poate fi utilizat pentru diagnosticul histopatologic al malariei [2] și al altor paraziți spirochetali și protozoarici din sânge. Este, de asemenea, utilizat în colorarea celulară a Wolbachia, care infectează Drosophila melanogaster .

Pata Giemsa este o pată clasică pentru frotiurile de sânge periferic și probele de măduvă osoasă. Eritrocitele se colorează în roz, trombocitele prezintă roz pal pal, limfocitele citoplasmei sunt colorate în albastru, citoclasmele monocitelor sunt colorate în albastru deschis, iar leucocitele colorează cromatina nucleară magenta. Este, de asemenea, utilizat pentru a afișa forma clasică a „pinului de siguranță” a Yersinia pestis .

Colorarea Giemsa este utilizată și pentru vizualizarea cromozomilor. Acest lucru este deosebit de relevant pentru detectarea infecției cu citomegalovirus , unde descoperirea clasică este incluziunea virală „ochi de bufniță”. [3]

Pata Giemsa este utilizată pentru a colora ciuperca histoplasmică, pentru a evidenția trofozoizii Pneumocystis , chlamydia și poate fi utilizată pentru identificarea mastocitelor . [4]

Sistemul este utilizat pentru diagnosticarea bolilor parazitare, cum ar fi malaria, folosind teste de sânge efectuate la microscop. Este, de asemenea, utilizat pentru numărul diferențial de leucocite.

Metodă

  • O picătură de sânge este depozitată lângă marginea lamelei specimenului și se face un frotiu pe lamă, care va fi lăsat să se usuce bine în aer. Se toarnă suficiente picături de lichid May-Grünwald pe frotiu pentru a-l acoperi și așteptați 3 minute.
  • Aici frotiul este fix deoarece vopselele sunt într - o soluție de alcool metilic (CH3OH).
  • Diluați vopseaua direct pe partea superioară a frotiului adăugând câte picături de apă distilată câte au existat de vopsea și lăsați-o să acționeze timp de 3 minute: în această fază, eozinații de albastru de metilen sunt disociați în eozină (vopsea acidă) și metilen (vopsea bazică) ).
  • Eozina va colora (lega) structurile bazice, în timp ce albastrul de metilen va colora structurile acide (de exemplu, nucleele).
  • Scurgeți pata înclinând lamela. Presărați lamela cu o soluție de Giemsa și apă distilată (diluare 1:10). Lăsați vopseaua să acționeze 10-20 de minute.
  • Spălați toboganul cu multă apă.
  • Lăsați diapozitivul să se usuce la aer.
  • Fața inferioară a lamelei (cea fără frotiu) poate fi uscată cu hârtie absorbantă.

Frotiul este gata pentru a fi observat.

Notă

  1. ^ Giemsa G. (1904), Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nocht'schen Chromatinfärbung . Centralblatt für Bakteriologie, I , Abteilung 32, p. 307-313.
  2. ^ (EN) Howard M. Shapiro și Francis Mandy, Citometrie în malarie: Trecând dincolo de Giemsa , în Citometrie Partea A, 71A, n. 9, 2007, pp. 643–645, DOI : 10.1002 / cyto.a.20453 . Adus la 18 mai 2020 .
  3. ^ GL Woods și DH Walker,detectarea infecției sau a agenților infecțioși prin utilizarea petelor citologice și histologice. , în Clinical Microbiology Reviews , vol. 9, nr. 3, 1996-07, pp. 382–404. Adus la 18 mai 2020 .
  4. ^ (EN) TE Damsgaard, Anne Braae Olesen și Flemming Brandt Sørensen, Mast cells și dermatită atopică. Cuantificarea stereologică a mastocitelor în dermatita atopică și pielea umană normală , în Arhivele Cercetării Dermatologice , vol. 289, nr. 5, 1 aprilie 1997, pp. 256–260, DOI : 10.1007 / s004030050189 . Adus la 18 mai 2020 .

Bibliografie

  • Douglas M. Anderson, A. Elliot Michelle, Mosby's medical, nursing, and Allied Health Dictionary ediția a șasea , New York, Piccin, 2004, ISBN 88-299-1716-8 .
  • Giemsa G, Das Wasen der Giemsa-Farbung , în Zentralb f Bakt , vol. 89, 1922-1923, pp. 99-106.

Elemente conexe

Alte proiecte

linkuri externe

Adus de la „ https://it.wikipedia.org/w/index.php?title=Colorazione_di_Giemsa&oldid=119209030 ”