Hemocultură

De la Wikipedia, enciclopedia liberă.
Salt la navigare Salt la căutare
Avvertenza
 Informațiile prezentate nu sunt sfaturi medicale și este posibil să nu fie corecte. Conținutul are doar scop ilustrativ și nu înlocuiește sfatul medicului: citiți avertismentele .
Două sticle de Bactec

Hemocultura se referă la cultura unei probe de sânge obținute în condiții sterile. Este o tehnică foarte importantă pentru diagnosticul microbiologic al bacteriemiei sau sepsisului .

Când să solicitați o cultură de sânge [1]

Există mai multe situații fiziopatologice în care este posibil să se suspecteze septicemia și să fie necesară o hemocultură pentru a anticipa intervențiile terapeutice .

Constatări sugestive la examinarea fizică
Febra sau hipotermia , tahipneea , tahicardia și hipotensiunea la o persoană cu antecedente de infecție sau intervenții chirurgicale recente sunt elemente suficiente pentru a necesita cultura probelor de sânge .
Date de laborator
Leucocitoza majoră (sau uneori leucopenia ) însoțită de trombocitopenie la un subiect cu o imagine obiectivă compatibilă trebuie considerată întotdeauna ca suspiciune de sepsis . Pot apărea hiperbilirubinemie și azotemie marcate, trombocitopenie severă cu timp prelungit de trombină , hiperlipidemie și hipoalbuminemie pe măsură ce imaginea septică progresează. Granulocitele neutrofile pot avea granulații toxice și vacuole citoplasmatice . La subiecții diabetici , septicemia poate începe cu hiperglicemie bruscă și poate duce la o comă cetoacidosică .
Modificări ale homeostaziei calciului
Septicemia severă este una dintre puținele afecțiuni capabile să ofere hipocalcemie adevărată , o afecțiune caracterizată printr-o reducere a calciului din sânge liber (care nu este legat de proteinele din sânge , cum ar fi albumina ).
Hemoliza
O septicemie Clostridium cauzează adesea o imagine hemolitică severă demonstrabilă prin prezența notabilă a hemoglobinei în urină și anemie . Infecțiile cu Plasmodium susțin o imagine similară; în acest caz, analiza frotiului subțire și a picăturii groase sunt ajutoare foarte importante pentru diagnosticul malariei .
Modificări ale echilibrului acido-bazic
Înainte de febră , hipoxemie și hipotensiune arterială apar, constatarea alcaloză respiratorie într - un subiect care urmează spitalizat intervenții chirurgicale sau proceduri invazive este de multe ori un semn precoce de bacteriemie din cauza a Gram negative bacterii . Ulterior, din cauza oboselii mușchilor respiratori și a acumulării de acid lactic , apare o acidoză metabolică cu un decalaj anionic ridicat.
Descoperiri instrumentale
Într - o imagine obiectivă compatibil, o toracica X - ray care demonstrează prezența unei pulmonare inflamatorii proces este un factor important în diagnosticul de sepsis secundare respiratorii infecție . Imaginile electrocardiografice caracterizate prin tahicardie sinusală și modificări nespecifice în segmentul ST sau unde T sunt deseori prezente în cazul septicemiei .

Retragere

Sângele trebuie prelevat înainte de vârful febrei. Cu toate acestea, având în vedere previzibilitatea dificilă a vârfului febril, eșantionarea poate avea loc în corespondență cu primele faze febrile.

Precizia eșantionării este fundamentală, care trebuie să aibă loc în condiții de sterilitate absolută (utilizarea mănușilor și dispozitivelor sterile) și după dezinfectarea pielii cu 70% alcool izopropilic , iodopovidonă sau 2% clorhexidină. Colectarea trebuie să aibă loc după uscarea dezinfectantului. La adulți, aproximativ 10 ml trebuie retrași; la copii este suficientă aproximativ 2-5 ml.

Este de preferat să faceți retrageri multiple (3 în 24 de ore sau cel puțin 2 în câteva ore) din diferite locații ale corpului. Cu toate acestea, în situații extrem de grave, 3 retrageri pe oră sunt, de asemenea, considerate valabile [2] .

Sângele trebuie colectat în recipiente speciale numite „sticle Bactec” (în sticle sângele este diluat, pentru a scădea activitatea bactericidă a serului sau a oricăror antibiotice); în sticle există:

De obicei, se folosesc două sticle pentru retragere; unul pentru căutarea anaerobilor și unul pentru căutarea aerobilor.

Sticlele Bactec trebuie transportate cât mai curând posibil la laboratorul de microbiologie. Materialul nu trebuie refrigerat și trebuie protejat de un recipient rigid și sigur pentru a evita spargerea, scurgerile accidentale sau picurarea.

Sticlele sparte, fără etichetă, depozitate mai mult de 72 de ore sau luate cu măsuri inadecvate sunt respinse de laborator.

Analize

Sticlele Bactec conțin un substrat cromogen (capabil să coloreze și să emită fluorescență) care este activat în prezența dioxidului de carbon , principalul catabolit al metabolismului bacterian . Probele colectate de la diferiți pacienți sunt incubate în „termostatul Bactec”, un sistem închis special capabil să verifice și să agite continuu (este o regulă bună) diferitele sticle Bactec. Dacă sistemul detectează luminiscența, acesta avertizează operatorii cu un semnal acustic, semnalizând, de asemenea, proba pozitivă. Multe probe, dintre cele mai frecvente infecții, pot fi pozitive în câteva ore. Cu toate acestea, unele bacterii neobișnuite (a se vedea mai jos) și atipice au perioade de creștere mult mai lungi. Tocmai din acest motiv, probele sunt păstrate în incubație timp de 7-14 zile.

Dacă proba este pozitivă, puteți continua luând material pentru „observare directă” și cultură. Observarea directă se face după centrifugarea probei (pentru concentrarea bacteriilor) și a colorării Gram ; pentru cultură, materialul este inoculat în Chocolate Agar, Blood Agar, MacConkey Agar, Sabouraud Agar și altele. Creșterea selectivă într-un mediu, însoțită de o colorare și un profil biochimic este un pas cheie în identificarea bacteriei.

Cele mai frecvent izolate sunt bacteriile (cazuri la 100 de subiecți bacteremici, 2003-2004) [3]

Bacterii gram pozitive Infecții în comunitate Infecții în spital
S. pneumoniae 14 2.6
S. aureus 7.6 17.5
Alți stafiloci 4 15.7
Diversi streptococi 12.3 4.2
Enterococi 3 7.7
S. bovis 1 0,1
Bacterii gram negative Infecții în comunitate Infecții în spital
E coli 26 12
Salmonella spp. 3 0
P. aeruginosa 7.6 15.9
Haemophilus spp. 7.2 0
N. meningitidis 2.4 0
N. gonorrhoeae 0,2 0
Bacili neobișnuiți Gram negativi
Grupul HACEK [4] , Bartonella spp. , Brucella spp. , Borrelia spp. , Legionella spp. , Francisella spp. , Bordetella holmesii .
Cocci și bacili gram pozitivi neobișnuiți
Abiotrophia spp. , Granulicatella spp. , Bacillus hackensackii , Mycobacterium spp. (Este posibilă și izolarea micoplasmei )

Identificarea bacteriei este urmată de comunicarea către secție pentru tratamentul antibiotic precoce; în plus, materialul este utilizat pentru prepararea unei antibiograme .

Bacteremia datorată cateterului venos central

Bacteremia și sepsisul sunt adesea asociate cu prezența unui cateter venos central (CVC). Prezența sepsisului în prima săptămână de la introducerea cateterului se datorează contaminării suprafeței externe (manevre nesterile). Ulterior, se crede că colonizarea microbiană apare în lumenul cateterului (utilizarea infuziilor contaminate, igienă slabă și măsuri comportamentale). În cazul simptomelor compatibile, la pacienții cu cateter, aceștia au nevoie de un diagnostic rapid care să permită stabilirea sursei infecției. Pentru a face acest lucru, cateterul ofensator poate fi îndepărtat pentru a stabili prezența unei sarcini microbiene responsabile de boală. Se folosesc 2 metode

Metoda semicantitativă a lui Maki sau a plăcii de rulare
Acesta constă în retragerea cateterului suspect și rularea ultimilor 4-5 centimetri pe o cutie Petri și numărarea numărului de colonii dezvoltate pe placă după incubare. Limita de diagnostic este stabilită la 15 colonii; odată depășită această limită, se admite că sepsisul se datorează cateterului venos central.
Metoda cantitativă de spălare Cleri sau bulion
Acesta constă în plasarea vârfului CVC într-un volum cunoscut de bulion steril, agitarea energică timp de 1 minut și însămânțarea unui volum de 100 μl pe mediu solid. Apoi continuăm cu incubația: limita de diagnostic este de 1.000 CFU (unități care formează colonii, care corespund direct numărului de bacterii) per cateter trimis.

Cu toate acestea, aceste 2 metode, deși foarte precise, vă permit să identificați sursa infecției numai după îndepărtarea cateterului, care poate nici măcar să nu fie infectat. De aici și necesitatea de a determina sursa infecțioasă fără a elimina CVC (procedura de inserție este invazivă și dificilă). O metodă foarte validă și utilizată este DTP, bazată pe conceptul că există o relație inversă între timpul de pozitivizare a lui Bactec și încărcătura microbiană a probei luate. La pacienții cu cateter venos central, hemocultura este prelevată simultan dintr-o venă periferică și din CVC: dacă proba de sânge venos periferic este pozitivă în mai mult de 2 ore decât cea luată din CVC, se presupune că bacteremia este legată la infectarea acestuia din urmă.

Alte metode

Deși metoda Bactec este de neînlocuit, dată fiind acuratețea și potențialul său, a devenit din ce în ce mai necesar să se creeze un sistem mai rapid pentru diagnosticul sepsisului.

Diagnosticul rapid al sepsisului cu PCR în timp real
Sistemul SeptiFast este o metodă introdusă recent în practica de laborator a bacteriologiei clinice. Este un nou test molecular în multiplex PCR în timp real pentru detectarea rapidă a bacteriilor și ciupercilor din sânge. Identifică agenții etiologici (bacterii și ciuperci Gram pozitive și negative) responsabili de 90% din sepsis, dar nu este capabil să identifice toate microorganismele.
Permite identificarea speciilor în mai puțin de șase ore (comparativ cu 4-5 zile pentru metoda tradițională). Rezultatul este independent de capacitatea de creștere a microorganismului și de prezența antibioticelor în proba de sânge (detectează ADN, nu este necesară o cantitate mare de bacterii). Are o sensibilitate ridicată de detectare a ciupercilor și a mai multor infecții bacteriene / fungice. Cu toate acestea, nu înlocuiește hemocultura, deoarece nu identifică toate bacteriile și nu efectuează antibiograma. Este posibil să se determine prezența genei mecA pentru rezistența la meticilină (tulpini MRSA) numai în probele pozitive pentru S. aureus . Proba necesară este de 1,5 ml de sânge, durata întregului proces este mai mică de 6 ore. Sistemul folosește, de asemenea, sonde marcate cu patru fluorofori diferiți și analiza de topire a ADN-ului amplificat; este prevăzută și eliminarea contaminanților amplificați. Software-ul de identificare dedicat se numește SIS (SeptiFast Identification Software).

Procalcitonină

Procalcitonina (PCT) este o proteină de 116 aminoacizi derivată din proteoliza intracelulară a precursorului ( calcitonină pre-pro). Calcitonina activă din punct de vedere fiziologic este produsă prin proteoliza procalcitoninei de către enzima pro-hormon convertază din celulele C tiroidiene . Procalcitonina, pe de altă parte, se găsește în circulație sub această formă intactă în caz de infecții bacteriene severe și sepsis și originea sa este extratiroidiană, produsă în principal de celule parenchimatoase și organe legate de sistemul imunitar. Modificări PCT în unele afecțiuni clinice: stări infecțioase de origine bacteriană, fungică și parazitară, cu manifestări sistemice asociate dar și în SIRS nu neapărat susținute de evenimente infecțioase, cum ar fi șocul cardiogen și traumatismele chirurgicale. La subiecții sănătoși, PCT este mai mică de 0,05 ng / ml; în timpul infecției, nivelurile PCT cresc, datorită sintezei crescute în siturile extra-tiroidiene (în special ficatul ): crește la 3 ore după administrarea endotoxinei și atinge vârfurile în jur de 8-24 ore, cu un timp de înjumătățire de 24 de ore. Detectarea nivelurilor ridicate de procalcitonină la subiecții cu suspiciune de sepsis este un element important pentru un anumit diagnostic; în aceste cazuri, terapia antiseptică și antibiotică trebuie începută imediat.

Notă

  1. ^ Harrison, Principiile medicinii interne (ediția a 16-a) , New York - Milano, McGraw-Hill, 2006, ISBN 88-386-2459-3 .
  2. ^ Anna M. Molina Romanzi, și colab. , Boli infecțioase ale sistemului cardiovascular , în Microbiologie clinică , Reprint 2004, Torino, UTET, 2002, p. 334, ISBN 88-7933-251-1 .
  3. ^ Anna M. Molina Romanzi, Giuseppe A. Botta; Letizia Calegari; Carlo Chezzi; Eugenio A. Debbia; Giorgio Palù; Gianni Pozzi; Carla Pruzzo; Luigi Robert; Gian Carlo Schito; Marco Toni; Maria Antonietta Tufano; Pier Egisto Valensin; Oliviero E. Varnier , Boli infecțioase ale sistemului cardiovascular , în Ristampa 2004, Torino, UTET, titlul Microbiologie clinică [2002] , p. 334, ISBN 88-7933-251-1 .
  4. ^ Haemophilus , Actinobacillus , Cardiobacterium , corrodens Eikenella , Kingella kingae

Bibliografie

  • Molina Romanzi, 2006, Microbiologie clinică . Primul Ed.
  • Jawetz, Melnick și Adelberg, 2008, Microbiologie medicală . A douăzeci și patra Ed.
  • La Placa, 2005, Principiile microbiologiei medicale . Zecea Ed.
  • Patrick R. Murray, 2008, Microbiologie medicală . Quinda Ed.
  • Antonelli, Clementi, Pozzi, Rossolini, 2008, Principiile microbiologiei medicale . Primul Ed.
  • Bistoni, Nicoletti, Nicolosi, 2002, Microbiologie și microbiologie clinică . Primul Ed.

Elemente conexe

Imagini conexe

  • Raport de hemocultură în infecțiile tractului urinar cauzate de Escherichia coli

  • Termostat Bactec; notați diferitele sticle din incubație

Alte proiecte

Adus de la „ https://it.wikipedia.org/w/index.php?title=Hemoculture&oldid=116934672 ”