Imunoelectroforeză
Imunoelectroforeza (Grabar) este o tehnică analitică care combină electroforeza normală în gel de agaroză cu o reacție de difuzie și imunoprecipitare (metoda Ouchterlony).
Etape:
- 1) Accidentul electroforetic al serului cu formarea benzii;
- 2) Se realizează o fantă longitudinală, paralelă cu direcția cursei electroforetice;
- 3) Fanta este umplută cu un ser animal imunizat împotriva proteinelor serice umane.
Rezultatul este formarea, îngroșarea și / sau curbarea „arcurilor de precipitație” în corespondență cu diferitele porțiuni ale benzii gamma, indicând prezența mai mare sau mai mică a fiecărui tip de imunoglobulină .
De fapt, din fanta laterală, antiserul îndreptat împotriva proteinei umane în studiu se difuzează cu un front plat de concentrație către banda proteică electroforetică. După cum se știe, precipitarea complexelor antigen-anticorp apare atunci când concentrațiile molare ale celor doi reactivi sunt comparabile (zonă de echivalență): nu în prezența unui exces de antingen și nici a unui exces de anticorp. Prin urmare, în locul punctelor în care procesele de difuzie respective prin gelul de agaroză al antiserului și ale proteinelor umane ating aceeași concentrație, există o precipitare a complexelor imune, care este evidențiată ca un arc [1] pe gel. Evident, cu cât concentrația proteinei în studiu va fi mai mare, cu atât va fi mai aproape de sulcul lateral al antiserului.
Exemple de aplicații
De exemplu, tehnicile de imunoelectroforeză își găsesc aplicarea în caracterizarea naturii moleculare a componentelor monoclonale ale MGUS și mielomului multiplu , alternativ sau pe lângă imunofixare , putând stabili clasa de anticorpi (IgG, IgA, IgM, Bence-Jones). În acest caz, antiserurile plasate pentru a reacționa în sulcusul adiacent loviturii electroforetice recunosc în mod specific porțiunile constante fie ale IgG, fie ale IgA, fie ale lanțurilor ușoare (kappa sau lambda). În timp ce se vor forma dungi neregulate de precipitat datorită policonalității imunoglobulinelor normale, reactivul specific clasei al componentei monoclonale va prezenta un arc bine definit.
Notă
- ^ În realitate, deoarece locusul punctelor echidistant de o linie și un punct este o parabolă, figura precipitațiilor va avea o formă mai asemănătoare cu o parabolă decât cu un arc de circumferință.
| Controlul autorității | Tezaur BNCF 15823 · LCCN (EN) sh85064557 · BNF (FR) cb119672637 (data) |
|---|
