Micropropagare

Micropropagarea este o tehnică de propagare a plantelor care permite obținerea unei clone a plantei în sine sau a unui set de indivizi cu același patrimoniu genetic, prin utilizarea metodelor moderne de cultură in vitro a celulelor și a țesuturilor plantelor. ^[1]

Micropropagarea diferă de alte sisteme de multiplicare a plantelor ( tăiere , răsărit , stratificare etc.) pentru tehnica de operare sofisticată, care permite reproducerea clonelor libere de infecții bacteriene și virale; această practică permite, de asemenea, pornind de la surse mici, să obțină o cantitate enormă de indivizi clonați.

Un răsad de trandafiri obținut prin cultură in vitro .

Etapele micropropagării

Pregătirea culturii

Culturi in vitro într-o cameră climatică sterilă.

Micropropagarea începe cu selectarea materialului vegetal de propagat. Alegerea și curățarea materialelor vegetale inițiale care nu conțin viruși și ciuperci sunt importante pentru producerea plantelor sănătoase. Adesea plantele inițiale sunt testate pentru a determina dacă sunt curate și fără virus.

În mod normal, materialul vegetal inițial este reprezentat de explante caulinare, cum ar fi mugurii apicali și mugurii axilari. În cazul plantelor ornamentale, este de asemenea posibil să începeți de la tuberculi și cuișoare . Anterele , petalele , polenul și alte țesuturi vegetale sunt, de asemenea, utilizate. După ce materialul a fost ales, mergi la câmp și ridici explantul materialului vegetal selectat. La efectuarea explantului este foarte important să evaluați:

• perioada explantului: trebuie făcută la reluarea activității vegetative în așa fel încât să aibă material în creștere activă și muguri care nu au suferit dominanța apicală;
• stadiul dezvoltării: trebuie evaluat gradul de diferențiere atins de celulele explant;
• dimensiunea explantului: în acest stadiu regula este că cu cât explantul este mai mic, cu atât va fi mai puțin contaminat. Cu toate acestea, există un dezavantaj, cu cât dimensiunea este mai mică, cu atât gradul de supraviețuire al explantului este mai mic. Deci, în ceea ce privește dimensiunile, trebuie căutat un compromis între aceste două aspecte.

Odată ce materialul a fost explantat, acesta este sterilizat, de obicei prin mai multe pasaje în înălbitor , spălat cu alcool etilic și în cele din urmă clătit cu apă sterilă.

Multiplicare

Culturi de țesuturi vegetale cultivate la o bancă de semințe USDA .

În faza de înmulțire, porțiunea mică de țesut vegetal, uneori doar o singură celulă, este plasată pe un mediu de cultură, conținând de obicei zaharoză ca sursă de energie și citokinine , care determină eclozarea mugurelui dând naștere unui germen. Din mugurii axilari ai acestei lăstari se vor dezvolta alți lăstari, creând un cluster. De obicei, mediul de cultură este îngroșat cu agar pentru a crea un gel care susține explantul în timpul creșterii.

Unele plante sunt ușor cultivate pe medii simple, dar altele necesită medii mai complicate pentru creștere, unele medii includ vitamine, minerale și aminoacizi. Mediul este sterilizat în timpul pregătirii pentru a preveni contaminarea cu ciuperci și bacterii, care pot depăși și sufoca explantul de creștere. Autoclavele și sterilizarea prin filtrare sunt utilizate pentru a elimina potențialii contaminanți. La o scară mică de producție este adesea folosită o oală sub presiune.

Este etapa în care există inducerea și dezvoltarea rădăcinilor accidentale la baza lăstarilor. Formarea rădăcinilor poate fi facilitată prin utilizarea unui mediu de cultură cu cantități reduse de săruri minerale și zaharuri, lipsă sau absență de citokinine și în special de auxine în concentrații cuprinse între 0,01 și 10 ppm . Cele mai frecvent utilizate auxine sunt IBA (acid indolbutiric) și IAA ( acid indol-3-acetic ). Această fază are o durată extrem de variabilă, la specia model durează în medie de la 3 la 5 săptămâni, la recalcitrant are o durată mult mai mare.

Ambianță

Răsaduri de banane transferate pe un substrat intermediar de vermiculită și sol din patul germinativ steril. Procedura se efectuează pentru aclimatizarea plantelor la sol. După un timp scurt plantele sunt transferate pe câmp.

Dacă s-a dezvoltat un sistem radicular bun, răsadul este pregătit pentru faza de aclimatizare și poate fi transferat la sol. Această fază începe cu transferul plantei din mediul in vitro în mediul in vivo, în borcane cu turbă și perlit, care garantează o bună retenție a apei. Aclimatizarea este o fază foarte delicată, deoarece planta trece de la heterotrofie la autotrofie . Evoluția către autotrofie are loc prin reducerea umidității și creșterea intensității luminii. În cele 2-4 săptămâni necesare pentru aclimatizare, răsadurile produc frunze noi, mai potrivite pentru noul mediu. Următorii pași implică cultivarea în sere și pe câmpuri deschise.

Notă

Bibliografie

• Gabriella Pasqua, Biologia celulară și biotehnologia plantelor , Piccin Editions.

linkuri externe

• (EN) micropropagare de orhidee, Axelsson's Orchid Site pe w1.112.telia.com. Adus la 22 ianuarie 2010 (arhivat din original la 16 martie 2010) .
• Blog pe Micropropagare , pe micropropagazione.blogspot.com .

Portal botanic : accesați intrările Wikipedia care se ocupă de botanică