Cultura microorganismelor
O cultură de microorganisme sau cultură microbiologică este o metodă de multiplicare a microorganismelor ( procariote sau eucariote ) într-un mediu de cultură predeterminat și în condiții de laborator controlate. Spre deosebire de limba italiană, limba engleză folosește termenul de cultură atât pentru cultură, cât și pentru cultură .
Culturile de microorganisme sunt utilizate pentru a determina tipul de organisme și / sau abundența din proba de testare. Este una dintre principalele metode de diagnostic în microbiologie și este utilizată pentru a determina cauza bolilor infecțioase, lăsând agentul patogen să se înmulțească într-un mediu prestabilit. Mai general, termenul cultură este utilizat informal pentru a se referi la o „creștere selectivă” a unui tip specific de microorganism din laborator.
Culturile de microorganisme sunt metode de bază utilizate pe scară largă în biologia moleculară . În acest context, o cultură „pură” sau „axenică” este definită ca o populație de celule sau organisme multicelulare care cresc în absența altor specii sau tipuri, adică în absența florei bacteriene străine.
Unul dintre cele mai comune medii pentru culturile microbiologice este agar , o substanță gelatinoasă derivată din alge marine . Un bun substitut pentru agar este guma de guar , care poate fi utilizată pentru izolarea și replicarea bacteriilor termofile.
Tipuri de culturi bacteriene
Medii de cultură solide
Sunt soluții nutriționale care se solidifică grație agarului și permit izolarea speciilor microbiene [1] . Culturile microbiologice pot fi cultivate pe cutii Petri de diferite dimensiuni. Aceste plăci au un strat subțire de mediu de creștere pe bază de agar, o polizaharidă complexă derivată dintr-o algă, care se topește la 98 ° C și își recapătă consistența gelatinoasă la o temperatură de 42 ° C [2] [3] . Odată ce mediul de creștere al unei farfurii Petri a fost inoculat cu bacteriile dorite, plăcile sunt incubate la temperatura optimă pentru creșterea acelei populații bacteriene. După însămânțare, este necesar în general un timp de incubație de cel puțin 24-48 de ore pentru a permite dezvoltarea coloniei bacteriene: o populație bacteriană, de fapt, pornind de la o singură celulă, crește exponențial, ceea ce înseamnă că fiecare nouă generație are un număr dublu de indivizi comparativ cu precedentul [4] . Pentru a facilita creșterea, temperatura este menținută constantă cu ajutorul unui termostat. O temperatură de aproximativ 37 de grade Celsius este fie animalele cu sânge cald, temperaturile mai scăzute sunt mai potrivite pentru culturile de mediu.
Medii de cultură lichide
O altă metodă de cultură bacteriană este cultura lichidă, în care bacteriile sunt suspendate în bulion lichid, un mediu nutritiv, de obicei o soluție de peptoni cu extract de carne și săruri minerale. Culturile lichide sunt considerate ideale pentru determinarea unui test antimicrobian. Experimentatorul inoculează bulionul lichid cu populația bacteriană studiată și îi permite să crească câteva ore (un agitator poate fi utilizat pentru o creștere mai uniformă). La sfârșitul fazei de creștere este nevoie de o fracțiune din probă pentru a testa activitatea antimicrobiană a unui anumit medicament sau antibiotic.
Compoziție chimică
Indiferent de starea fizică a solului (solid sau lichid), este important să aveți o compoziție chimică controlată, de fapt, datorită acestei caracteristici culturale, este posibil să se promoveze creșterea unui stoc unic de celule și să se inhibe alte forme de viață în pentru a studia eșantionul evitând majoritatea erorilor adesea datorate prezenței microorganismelor capabile să modifice rezultatul creșterii. Compoziția chimică variază de la sol la sol, dar este încă posibil să se întocmească o listă a componentelor utilizate cel mai des:
· Apă
Carbohidrați
Săruri anorganice
Peptones
· Hidrolizate
Agenți solidificatori
· Substanțe îmbogățitoare
Substanțe selective
Indicații
Multe specii bacteriene sunt atât de asemănătoare între ele încât este practic imposibil să le deosebim morfologic folosind singur microscopul. Din acest motiv, pentru a identifica bacteriile prezente în proba colectată, este necesar să se studieze caracteristicile lor biochimice cultivându-le în medii de cultură speciale. Un mediu de cultură special conține substanțe care inhibă creșterea multor specii bacteriene, dar nu și tipul de bacterii pe care doriți să le izolați. În unele cazuri, mediul de cultură conține unele zaharuri speciale care pot fi utilizate doar de anumite bacterii. În alte soluri, se adaugă indicatori care schimbă culoarea în funcție de pH-ul solului, adică numai dacă există prezența bacteriilor care sunt capabile să fermenteze anumite substanțe care dau naștere cataboliților acizi. Dacă bacteriile țintă sunt capabile de fermentare, ele generează, de asemenea, gaz care poate fi detectat atunci când cultura este condusă într-un tub închis. Alte medii speciale de cultură pot permite identificarea bacteriilor care produc anumite enzime. În acest fel, unele bacterii care produc enzime hemolitice (capabile să descompună celulele roșii din sânge) produc hemoliză și provoacă modificări apreciabile macroscopic în plăcile de agar din sânge. Într-un laborator microbiologic de spital este necesar să existe disponibilitatea a numeroase medii și tehnici de cultură, deoarece această variabilitate este necesară pentru identificarea bacteriilor care cauzează boli infecțioase și sensibilitatea sau rezistența acestora la diferite tipuri de antibiotice. Testele de cultură sunt utilizate în mod normal în medicină pentru a identifica posibila prezență a agenților patogeni în fluidele corporale (în special sânge sau urină).
Notă
- ^ Bistoni F, Nicoletti G, Nicolosi V. Microbiologie și microbiologie clinică. Elsevier Masson. (2008) ISBN 978-88-214-2431-1
- ^ Tortora GJ, Funke BR, Caz CL. Elemente de microbiologie. Pearson Paravia. (2008). ISBN 978-88-7192-433-5
- ^ Praglia C. Microbiology. Editor articulații. (1999) ISBN 88-09-21791-8
- ^ La Placa M. Principiile Microbiologiei Medicale. Aesculapius. (2010). ISBN 887488365X
Elemente conexe
Alte proiecte
-
Wikimedia Commons conține imagini sau alte fișiere despre cultura microorganismelor
| Controlul autorității | NDL ( EN , JA ) 00560482 |
|---|
