Mediu de cultura

De la Wikipedia, enciclopedia liberă.
Salt la navigare Salt la căutare
Placă de agar cu colonii.jpg

În general, mediile de cultură sunt soluții solide sau lichide care conțin substanțe nutritive pe care pot fi cultivate celule eucariote și procariote . Mediile de cultură bacteriene, adică cele pe care pot crește coloniile bacteriene și alte procariote, sunt mai simple decât cele eucariote.

Pentru microorganismele fotolitotrofe autotrofe precum cianobacteriile , componenta principală a unui mediu de cultură este de exemplu CO 2 . Un mediu poate fi solidificat prin simpla adăugare de 1,5% agar agar . Agar este o polizaharidă structurală, extrasă dintr-o algă roșie, care acționează ca un agent de solidificare prin transformarea mediului în jeleu și care nu este digerată de bacterii. Este foarte util atunci când este necesar să se cultive microorganisme la suprafață. Dacă știm ce organism trebuie să izolăm și să-i cunoaștem metabolismul , putem pregăti mediul de cultură cu toți nutrienții de care are nevoie microorganismul; pentru o pregătire corectă a mediului de cultură, nu trebuie neglijați alți factori precum pH-ul , osmolaritatea și temperatura.

Elementele fundamentale pentru creșterea microorganismelor sunt: C , H , O , N , S , P (conținut în aminoacizi , zaharuri și acizi nucleici ); există alte elemente care nu sunt ușor solubile și trebuie adăugate sub formă de sare (cea mai solubilă formă a acestor elemente): N, P, S, Mg ; altele sunt adăugate doar în cantități mici: Fe , Ca , Co , Mn (care acționează ca cofactori enzimatici ai unor reacții).

Clasificarea cantitativă a solurilor

Pe baza substanțelor pe care le conțin și a concentrațiilor lor relative, mediile de cultură sunt clasificate ca:

  1. Sintetic (sau definit)
  2. Complexe

Medii sintetice sau definite

Solurile sintetice sau definite sunt cele a căror compoziție exactă este cunoscută. Sunt aproape întotdeauna pregătiți ad hoc în funcție de nevoile nutriționale ale microorganismului pe care doriți să îl creșteți. În general, conțin un număr definit de substanțe de concentrație cunoscută. Cu toate acestea, unele terenuri sunt mult mai complexe. Aceste tipuri de sol sunt utilizate pe scară largă în cercetare, deoarece este adesea necesar să se cunoască substratul care este metabolizat de microorganismul care urmează să fie cultivat.

Terenuri complexe

Solurile complexe sunt acele soluri a căror compoziție chimică nu este cunoscută în detaliu. Aceste medii de cultură sunt extrem de utile deoarece permit speciilor cu nevoi nutriționale foarte diferite sau specii ale căror nevoi nutriționale nu sunt încă bine cunoscute să crească în același timp. Pe lângă substanțele „standard”, solurile complexe conțin:

  1. Peptonele , hidrolizate proteice care derivă dintr-o digestie proteolitică parțială (aceste proteine ​​particulare sunt parțial hidrolizate altfel s- ar denatura la temperaturi ridicate);
  1. Extractele de carne slabă , bogate în aminoacizi , peptide , nucleotide , acizi organici, vitamine și săruri minerale ;
  2. Extractele de drojdie , bogate în vitamina B și compuși de carbon și azot.

Clasificarea calitativă a solurilor

Pe baza sarcinii pe care trebuie să o îndeplinească un teren, se disting următoarele:

  1. Medii generale sau de bază
  2. Terenuri elective sau îmbogățite
  3. Medii selective
  4. Terenuri diferențiale
  5. Terenuri de îmbogățire

Medii generale sau de bază

Sunt soluri fără aditivi speciali, permit creșterea și dezvoltarea multor specii bacteriene. [1] Cele mai frecvent utilizate medii generice sunt Agar Nutrient , Bulion Nutrient , Agar de Soia Triptic și Agar cu Număr de Plăci .

Sunt utilizate în general pentru numărul total de bacterii.

Terenuri elective sau îmbogățite

Sunt soluri bogate în nutrienți, adesea cu prezență de sânge de oaie sau de cal, gălbenuș de ou, albumină sau amestecuri definite chimic (de exemplu vitamine sau aminoacizi) care permit creșterea speciilor microbiene care necesită nutriție. Puneți sânge sau ser, pentru a imita mai bine condițiile găsite în organismul care găzduiește un anumit microorganism.

Medii selective

Sunt soluri care favorizează creșterea numai a anumitor specii bacteriene datorită prezenței factorilor care inhibă dezvoltarea altor specii. Acești factori se numesc substanțe inhibitoare și pot fi antibiotice, coloranți sau săruri. Câteva exemple de substanțe inhibitoare pot fi:

  1. Violet de cristal : inhibă bacteriile Gram +
  2. Verde strălucitor : inhibă bacteriile Gram + și Shigella
  3. Cetrimidă : favorizează creșterea Pseudomonas aeruginosa
  4. Azidă de sodiu (NaN 3 ): inhibă în funcție de concentrațiile sale: dacă concentrația este scăzută, creșterea Gram- este inhibată, dacă concentrația este ridicată și Gram + sunt inhibate.
  5. Antibiotice : inhibă dezvoltarea bacteriilor, favorizând cea a drojdiilor și mucegaiurilor
  6. Clorură de sodiu : la concentrații mari (> 3%) inhibă majoritatea microorganismelor (cu excepția stafilococilor )
  7. Săruri biliare : inhibă în funcție de puritatea lor: dacă nu sunt purificate, acestea inhibă bacteriile neenterice (cu excepția enterococilor ), dacă sunt purificate și fracționate, inhibă orice bacterii neenterice
  8. Lactoză : pentru a face Escherichia coli să producă acizi pentru fermentare
  9. Săruri de plumb : pentru a face să reacționeze cu hidrogenul sulfurat produs de salmonella care în acest fel precipită și face salmonella gri negricioasă

Terenuri diferențiale

Acestea sunt medii care, datorită prezenței anumitor componente, permit să se facă distincția între diferite grupuri de bacterii, permițând o identificare prezumtivă a speciilor izolate (cum ar fi agar MacConkey , agar sare manitol , MR-VP sau agar TSI ). Componentele prezente într-un teren diferențial pot fi:

Terenuri de îmbogățire

Utilizate în probe polimicrobiene, acestea sunt medii care permit creșterea încărcăturii speciei bacteriene pe care suntem interesați să o izolăm, datorită prezenței unor factori care încetinesc creșterea speciilor bacteriene contaminante prezente în proba examinată. Un exemplu este proba de scaun în care se suspectează că există o încărcătură redusă de Salmonella: pot fi utilizate medii de îmbogățire în care, în același timp, flora colonizantă este trimisă în bacteriostază, în timp ce se promovează replicarea salmonelelor care începând de la o sarcină redusă va deveni atât de evidentă încât pot fi izolate pe un teren solid.

Notă

  1. ^ Copie arhivată , pe iisalessandrini.it . Adus pe 9 februarie 2019 (depus de „url original 9 februarie 2019).

Elemente conexe

Alte proiecte

linkuri externe

Controlul autorității LCCN (EN) sh85034761 · NDL (EN, JA) 00.560.479
Microbiologie Portalul de microbiologie : Accesați intrările Wikipedia care se ocupă de microbiologie