Blot sud-vestic
Salt la navigare Salt la căutare
Această intrare sau secțiune despre biologie nu citează sursele necesare sau cei prezenți sunt insuficienți . |
Blotul Southernwester (interattomica) este o metodă de identificare a proteinelor care leagă ADN-ul , pe baza separării electroforetice a proteinelor și a membranei de transfer ulterioare - folosește o combinație de Western blotting și Southern , de unde și numele.
Pași:
- un extract proteic, în care se presupune că există o proteină de legare a ADN-ului, este separat pe izoelectrofocus 2D PAGE urmat de SDS / PAGE și ulterior electrotransferat la membrană;
- pata este renaturată pentru a elimina SDS și permite interacțiunea ADN / PROTEINĂ;
- în cele din urmă, pata este hibridizată cu o sondă radioactivă și procesată ca de obicei prin îndepărtarea sondei nelegate sau în exces prin spălare.
Legătura ADN / PROTEINĂ este detectată cu oricare obținută cu sisteme de detectare a semnalului sondei marcate (autoradiografie, chemoluminiscență).
Astfel, pete de sud-vest indică prezența proteinelor capabile să lege o secvență dată, oferind în același timp informații despre punctul lor izoelectric și greutatea moleculară .