Blot sud-vestic

De la Wikipedia, enciclopedia liberă.
Salt la navigare Salt la căutare

Blotul Southernwester (interattomica) este o metodă de identificare a proteinelor care leagă ADN-ul , pe baza separării electroforetice a proteinelor și a membranei de transfer ulterioare - folosește o combinație de Western blotting și Southern , de unde și numele.

Pași:

  1. un extract proteic, în care se presupune că există o proteină de legare a ADN-ului, este separat pe izoelectrofocus 2D PAGE urmat de SDS / PAGE și ulterior electrotransferat la membrană;
  2. pata este renaturată pentru a elimina SDS și permite interacțiunea ADN / PROTEINĂ;
  3. în cele din urmă, pata este hibridizată cu o sondă radioactivă și procesată ca de obicei prin îndepărtarea sondei nelegate sau în exces prin spălare.

Legătura ADN / PROTEINĂ este detectată cu oricare obținută cu sisteme de detectare a semnalului sondei marcate (autoradiografie, chemoluminiscență).

Astfel, pete de sud-vest indică prezența proteinelor capabile să lege o secvență dată, oferind în același timp informații despre punctul lor izoelectric și greutatea moleculară .

Notă

Biologie Portalul de biologie : Accesați intrările Wikipedia care se ocupă de biologie