Clemă de fixare

Diagrama care prezintă variațiile tehnicii de fixare a patch-urilor.

Patch clamp („blocarea zonei”) este o tehnică utilizată în electrofiziologie pentru a măsura curenții care trec prin canalele ionice individuale din membrana celulară . A fost introdus în 1976 de doi erudiți germani, Erwin Neher și Bert Sakmann , care au primit Premiul Nobel din 1991. ^[1]

Tehnica de fixare a patch-urilor constă în blocarea diferenței de potențial electric într-o zonă mică a membranei celulare sau a întregii celule. Prin urmare, este posibil să se analizeze modalitățile prin care canalele ionice afectează atât diferența de potențial la nivelul membranei, cât și procesele celulare, cum ar fi secreția și contracția. Clema poate fi utilizată pe culturi celulare de celule izolate sau chiar pe felii subțiri de țesut cerebral (felii cerebrale). În ciuda simplității sale inerente, a durat mulți ani pentru a dezvolta această tehnică. Se utilizează un singur microelectrod , format dintr-o micropipetă de sticlă al cărei capăt cu un diametru de 1 micrometru și o rezistență de 1-10 Mega Ohm , este făcut să adere perfect la o membrană celulară permițând astfel izolarea unei zone mici a membranei ea însăși și canalele ionice prezente în ea. În acest moment este posibilă modificarea și manipularea chimică sau electrică a canalelor în sine pentru a le studia proprietățile.

Celulele neuronale ale hipocampului . Micropipeta din fotografie a fost evidențiată cu culoarea albastră.

Tehnica patch clamp poate fi utilizată pentru a investiga diferitele tipuri de transmitere între celule și, într-adevăr, a permis identificarea potențialului nu numai a axonilor celulelor mari, deja detectate prin tehnici tradiționale de clamp de tensiune , ci și a tuturor mamiferelor. omule . ^[2] În înregistrarea tehnică definită a celulei "întreaga celulă" (in toto), este posibil să se obțină o incluziune în citoplasmă , datorită îndepărtării clapetei membranei în punctul lumenului pipetă. Aceste inovații au permis studii precise asupra celulelor sistemului nervos, precum cele efectuate de cercetătorii de la Universitatea din Kyoto care au reușit să dezvolte o tehnică care eliberează suprafața neuronilor de celulele gliale și ulterior sudează micropipeta pe neuron. prin pătrunderea în membrană. ^[2]

Notă

^ Premiul Nobel pentru fiziologie sau medicină 1991 , la www.nobelprize.org . Adus la 15 ianuarie 2018 .
^ ^a ^b "Tehnica patch clamp", de Erwin Neher și Bert Sakmann, public. în „The Sciences (Scientific American)”, num. 285, mai 1992, paginile 30-38

Bibliografie

( EN ) Reinhold Pennere Erwin Neher, The Patch-Clamp Technique in the Study of Secretion , public. în „Tendințe în neuroștiințe”, 12, n.4, aprilie 1989
( EN ) W. Stuhmer, Structural-Function Studies of Voltage-Gated Ion Channels , public. în „Revista anuală a biofizicii și chimiei biofizice”, 20, 1991, paginile 65-78

Alte proiecte

Wikimedia Commons conține imagini sau alte fișiere despre clema Patch

Controlul autorității	LCCN ( EN ) sh95001113

[1] Premiul Nobel pentru fiziologie sau medicină 1991 , la www.nobelprize.org . Adus la 15 ianuarie 2018 .

[Pat-2] "Tehnica patch clamp", de Erwin Neher și Bert Sakmann, public. în „The Sciences (Scientific American)”, num. 285, mai 1992, paginile 30-38

[1]

[2]