Testul Kastle-Meyer
Testul Kastle-Meyer este un test prezumtiv [1] folosit pentru a detecta posibile urme de hemoglobină pe un anumit obiect, chiar dacă a fost ascuns. Nu este acceptabil ca test, dar a fost folosit de poliția științifică pentru a efectua un prim control și, în cazul unei constatări pozitive, continuăm cu investigațiile. În majoritatea cazurilor, acest test a fost înlocuit de testul Combur, bazat pe același principiu de reacție la o activitate peroxidază a hemoglobinei, dar care folosește tetrametilbenzidina (C 16 H 20 N 2 ) ca reactiv. [2]
Pentru a crea reactivul Kastle-Meyer, fenolftaleina (C 20 H 14 O 4 ) este oxidată (se elimină doi electroni) și pre-dizolvată într-o soluție alcalină care conține zinc ; în final se amestecă cu hidroxid de potasiu (KOH); soluția este acum incoloră (C 20 H 14 O 4 + KOH).
Grupul hemic conținut în hemoglobina din sânge efectuează o activitate similară cu cea a peroxidazei , un grup de enzime care descompune compușii organici atunci când intră în contact cu peroxidul de hidrogen (H 2 O 2 ) [3] .
Pentru ca reacția să aibă loc mai rapid, se recomandă separarea grupului hem de hemoglobină , pentru a face acest lucru folosind etanol (alcool etilic).
Acum EME grupul poate intra în contact cu peroxid de hidrogen, de rupere jos până ajunge în apă (H2O) și oxigen (O); fenolftaleina caută un atom de oxigen și, prin urmare, se leagă de radicalul eliberat de peroxidul de hidrogen , prin urmare are loc o reacție de oxidare a fenolftaleinei care își schimbă culoarea devenind roz.
Prin urmare, procedura cuprinde 4 faze:
- Detectarea unei probe
- Adăugare de 95% etanol (aprox.)
- Adăugarea de fenolftaleină 2% în hidroxid de potasiu (reactiv Kastle-Meyer)
- Adăugarea de peroxid de hidrogen [4]
Proba este detectată folosind un tampon pentru gât udat cu apă distilată (pentru a detecta substanțele uscate) sau cu o hârtie de contact.
Dacă soluția Kastle-Meyer devine roz în câteva secunde înseamnă că există hemoglobină ; dacă dimpotrivă nu schimbă culoarea în câteva secunde, testul este negativ.
Într-o primă versiune a testului, 10% peroxid de hidrogen și 95% etanol au fost adăugați la fenolftaleină în cantități egale, dar în acest caz testul poate da fals pozitivi, deoarece fenolftaleina poate reacționa cu alte substanțe oxidante . [5]
În a doua versiune a testului, se adaugă mai întâi etanol; dacă observați schimbarea culorii chiar înainte de a adăuga peroxidul de hidrogen, nu continuați, testul este fără îndoială negativ [5] .
Acest test, la fel ca toate testele prezumtive, poate da fals pozitive: de fapt, poate reacționa cu substanțe peroxidazice de origine vegetală. Mai mult, nu face discriminare între sângele uman și cel animal.
Notă
- ^ http://www.giappichelli.it/custom/materiali/3482900/po8.pdf
- ^ Crime Scene Chemistry: The Kastle-Meyer Test for Blood , la www.sciencebuddies.org . Adus la 22 februarie 2016 .
- ^ Peroxidază , în Enciclopedia Treccani . Adus la 22 februarie 2016 .
- ^ University of Derby, Testele prezumtive pentru sânge , 10 februarie 2014. Accesat la 22 februarie 2016 .
- ^ a b Dr. RV Winchester ESR Criminalistic, Biotech Blood Detection ( PDF ), la nzic.org.nz.