Clonarea pozițională
Această intrare sau secțiune despre genetică nu citează sursele necesare sau cei prezenți sunt insuficienți . |
Clonarea pozițională este definită ca o tehnică genomică specială care permite cartarea unei singure gene în orice genom pornind de la informații precise. De fapt, pentru a fi aplicată, această tehnică trebuie să se bazeze pe hărți particulare, cum ar fi harta genetică (care măsoară distanța genelor în Centimorgan ), harta citologică (care studiază bandele cromozomiale ) și harta fizică (care măsoară distanța dintre genele din pb ) și mai ales corelația dintre harta genetică și cea fizică este fundamentală.
Pentru cartografierea și izolarea unei gene prin clonarea pozițională, este necesară cartografierea clonelor genei în studiu pe harta fizică pentru a reduce câmpul de căutare pe un singur locus cromozomial și ulterior prin „sărituri” sau „căi” cromozomiale pentru a cartografia definitiv gena. Cu toate acestea, pentru a face aceste „salturi” este necesar să aveți markeri sau „puncte fixe” care să permită să existe puncte de referință în interiorul lanțurilor nucleotidice foarte lungi.
Dintre acestea cunoaștem SNP-uri (polimorfism unic-nucleotidic) și RFLP (polimorfisme de lungime a fragmentului de restricție sau mutații care determină variații ale lungimii fragmentelor de ADN produse prin digestie cu enzime de restricție). Procedurile majore utilizate pentru cartografierea unei gene prin clonarea pozițională utilizează reacția în lanț a polimerazei (PCR) pentru a mări genomul, blotul sudic pentru a lega secvențele studiate pe clonele hărții fizice corespunzătoare și în cele din urmă hibridizarea in situ pentru a localiza genă din genom .
