Tampon TAE
Tamponul TAE este o soluție utilizată în „ electroforeza agarozei pentru separarea acizilor nucleici precum ADN și ARN [1] . Este compus dintr-o soluție de Tris-acetat, în general la pH 8,0, și EDTA care sechestrează cationii divalenți. Tamponul TAE are o putere de tamponare mai mică decât bufferul TBE care, prin urmare, poate fi reutilizat mai puțin decât celălalt tampon și trebuie deseori înlocuit dacă se efectuează numeroase electroforeze. Cu toate acestea, este important să subliniem că ADN-ul dublu catenar rulează mai repede în TAE
Pregătirea
Pentru 1 litru de tampon TAE 50x utilizați:
- 242 g bază Tris (2-amino-2-hidroximetil-propan-1,3-diol) (= 2 moli)
- 57,1 ml acid acetic glacial (= 100% acid acetic) (57,19 ml = 1 mol)
- 100 mL 0,5 M Na 2 EDTA (pH 8,0)
- Se toarnă H2O până când se ajunge la un volum total de 1 litru.
Pentru a prepara 0,5 M EDTA Na2 (pH 8,0) , se adaugă 186,1 g de etilendiaminotetraacetat disodic în DDH 2 O până la 800 ml de H 2 O. Se agită viguros. Aduceți pH-ul la 8,0 cu NaOH (aproximativ 20 g de NaOH). Se aduce la volum (1L) cu ddH 2 O. Sterilizați într-o autoclavă. Atenție: Sarea disodică EDTA nu se solubilizează până când soluția este la pH aproximativ 8,0 prin adăugarea de NaOH.
Notă
- ^ Ogden, RC și Adams, DA, Electroforeza în geluri de agaroză și acrilamidă. Metode Enzymol., 152, 61-87 (1987)
