Metoda Golgi

De la Wikipedia, enciclopedia liberă.
Salt la navigare Salt la căutare
Desen Camillo Golgi al hipocampului tratat cu metoda azotatului de argint
Desenarea celulelor Purkinje în cortexul cerebelului de Santiago Ramón y Cajal, demonstrând în mod clar puterea metodei de colorare Golgi în dezvăluirea detaliilor fine.
Un neuron piramidal uman neocortical colorat prin tehnica Golgi. Rețineți dendrita apicală care se extinde vertical deasupra soma și numeroasele dendrite bazale care radiază lateral de la baza corpului celulei .

Metoda Golgi sau impregnarea cu crom-argint este o tehnică de microscopie optică care permite vizualizarea perfectă a celulelor țesutului nervos . Impregnarea crom-argintie a fost numită inițial o reacție neagră , deoarece provoacă o colorare neagră a neuronului și a organelor sale.

Această metodă a fost dezvoltată în 1873 de medicul chirurg italian Camillo Golgi , care lucra în orfelinatul Incurabilului din Abbiategrasso și care a fost mereu angajat în studiul sistemului nervos (teza sa a fost regizată de Cesare Lombroso ).

Colorarea Golgi a fost folosită și în mod renumit de neuroanatomistul Santiago Ramón y Cajal (1852-1934), care a descoperit odată cu aceasta o serie de fapte noi despre organizarea sistemului nervos, inspirând nașterea doctrinei neuronilor . Ramon y Cajal a îmbunătățit în cele din urmă tehnica folosind o metodă pe care a numit-o „dublă impregnare”. Tehnica de colorare Ramon y Cajal, încă în uz, se numește colorare Cajal.

Mecanism

Celulele țesutului nervos sunt dens ambalate și puține informații despre structurile și interconectările lor pot fi obținute dacă toate celulele sunt colorate. Mai mult, extensiile filamentoase subțiri ale celulelor neuronale, inclusiv axonii și dendritele neuronilor, sunt prea subțiri și transparente pentru a fi văzute cu tehnici normale de colorare. Metoda lui Golgi colorează un număr limitat de celule aleatorii în întregime. Mecanismul prin care se întâmplă acest lucru este încă în mare parte necunoscut. [1] Dendritele, precum și soma celulelor, sunt clar colorate în maro și negru și pot fi urmărite pe toată lungimea lor, ceea ce le-a permis neuroanatomiștilor să urmărească conexiunile dintre neuroni pentru a face vizibilă structura rețelei. părți ale creierului și măduvei spinării .

Metoda de executare

Conform site-ului SynapseWeb, [2] rețeta pentru pata Golgi constă din:

  1. Scufundați un bloc (aproximativ 10x5 mm) de țesut cerebral fixat cu formaldehidă (sau perfuzat cu paraformaldehidă - glutaraldehidă ) timp de două zile într-o soluție apoasă 2% de dicromat de potasiu .
  2. Uscați scurt blocul cu hârtie de filtru .
  3. Înmuiați blocul într-o soluție apoasă 2% de azotat de argint pentru încă 2 zile.
  4. Tăiați secțiuni de aprox. 20-100 µm grosime.
  5. Deshidratați rapid în etanol (de exemplu, în Depex sau Enthalan ).

Această tehnică a fost perfecționată ulterior prin înlocuirea precipitatului de argint cu aur, prin scufundarea probei în clorură de aur și apoi în acid oxalic și îndepărtarea ulterioară a argintului cu tiosulfat de sodiu . Aceasta păstrează un grad mai mare de structură fină, cu detaliile ultrastructurale marcate de mici particule de aur. [1] [ conexiune întreruptă ]

Citate despre metodă

Ramón y Cajal a spus despre metoda Golgi:

Am exprimat surpriza pe care am trăit-o după ce am văzut cu ochii mei minunatele puteri revelatoare ale reacției crom-argint și absența oricărei emoții în lumea științifică trezită de descoperirea ei .
Recuerdos de mi vida , Vol. 2, Historia de mi labor científica . Madrid: Moya, 1917, p. 76.

Notă

  1. ^ JG Nicholls, De la neuron la creier , Sinauer Associates, 2001, p. 5, ISBN 0-87893-439-1 , / ISSN.
  2. ^ Spacek, J., Fiala, J., vizualizarea dentritice Tepii , la synapses.clm.utexas.edu, SynapseWeb, 28 iunie 2002. Adus de 17 iunie 2010 (arhivate de la original la data de 26 iunie 2010).

Elemente conexe

linkuri externe

Adus de la „ https://it.wikipedia.org/w/index.php?title=Metodo_di_Golgi&oldid=118646415 ”