Fagul M13
Această intrare sau secțiune despre biologie nu citează sursele necesare sau cei prezenți sunt insuficienți . |
| Fagul M13 | |
|---|---|
 | |
| Clasificarea virușilor | |
| Domeniu | Acytota |
| grup | Grupul II ( virus ADNs ) |
| Familie | Inoviridae |
| Tip | Inovirus |
| Specii | Fagul m13 |
Fagul este un fag M13 filamentos, este format din ADN monocatenar și este specific masculin, deoarece pătrunde în celula gazdă prin pilus.
Ciclu de viață
Fagul M13 absoarbe pilusul printr-o capsidă proteică GP3. Catenă de ADN care pătrunde în celulă este catenară simplă și se numește „catenă +”. Odată ajuns în interiorul celulei, ADN-ul este transformat într-o moleculă circulară cu dublă catenă numită „formă replicativă” (RF). ADN-ul ds este reprodus de mai multe ori și în același timp sunt transcrise genele care codifică proteinele structurale ale fagului. Când aproximativ 100-200 de copii ale fagului au fost sintetizate, produsul genetic 5 (Gp5) se leagă de catenele + ss și le împiedică să se replice. Filamentele pot astfel interacționa cu membrana celulară prin Gp7 și Gp9 și, odată ce contactul este făcut, Gp5 este înlocuit cu Gp8 și Gp3. Fagul astfel asamblat este extrudat din celulă fără a fi lizat.
Replicarea genomului
ADN-ul fagic care intră în celulă este monocatenar și se numește „catena +”. La penetrare, ARN polimeraza celulei gazdă sintetizează un primer la originea replicării. ADN polimeraza III gazdă începe să sintetizeze catena complementară care este denumită „- catena”. Când Pol III întâlnește primerul, acesta se disociază de ADN. ADN Pol I cu activitate de exonuclează 5 'îndepărtează grundul și umple „golul”. În cele din urmă, Ligaza sudează cele două întinderi de ADN. Sinteza catenei - dă naștere la un ADN dublu catenar numit „formă replicativă”. Cele două fire - și + ale RF sunt apoi reproduse separat și cu două mecanisme diferite. Produsul genei 2 este o endonuclează care produce o porțiune pe catena + a RF și rămâne atașată la fosfat în 5 'lăsând capătul 3' liber. Proteina Rep gazdă este o helicază care ajută la desfacerea ADN-ului la porecla. ADN-ul Pol III al gazdei folosește capătul 3 'liber ca grund pentru sinteza unui fir nou + în timp ce cel vechi este îndepărtat. Odată ce replicarea este completă, se obțin două molecule de ADN: o bicatenară circulară și una monocatenară unde Gp2 sudează capetele 5 'și 3' cu o reacție de transesterificare și recreează o catenă circulară +. Acest proces continuă până când Gp5 începe să se acumuleze. Această proteină se leagă de ADN monocatenar + și împiedică reproducerea acesteia în continuare.
M13 ca vector de clonare
Deoarece ADN-ul M13 este monocatenar, acest bacteriofag reprezintă un vector convenabil pentru clonarea ADN-ului. Lungimea genomului său nu este fixă și, prin urmare, este capabilă să accepte ADN străin fără a compromite viabilitatea fagului. Un anumit vector de clonare care exploatează ciclul de viață al fagului M13 se numește "Fagemid".
Fagemida este o moleculă circulară de ADN bicatenar care conține o origine de replicare a plasmidei (Ori V) și originea de replicare a M13, dar nu conține genele care codifică proteinele structurale ale fagului. În fagemid se poate clona o secvență de ADN de interes și se dorește să fie exprimată într-o populație de celule prin exploatarea infecției cu fag. Deoarece fagemida conține doar originea replicării fagilor, este incapabilă să genereze proteinele structurale necesare pentru asamblarea fagului și pentru ambalarea ADN-ului în acesta. Din acest motiv este utilizat Helper Phage M13K07. Acest fag conține o origine a replicării și codifică toate proteinele structurale ale fagului. Când celulele care conțin Phagemid sunt suprainfectate cu M13K07, Gp2 recunoaște ca o origine fagică prezentă pe Phagemid care, în consecință, este replicată și împachetată împreună cu proteinele structurale codificate de Fagul Helper.
Elemente conexe
Alte proiecte
-
Wikimedia Commons conține imagini sau alte fișiere despre Fago M13 -
Wikispecies conține informații despre Fago M13
