CLARITATE
CLARITY ( acronim pentru C learn, L ipid-exchange, A natomically R igid, I maging / immunostaining compatible, T issue h Y drogel , așa cum este citat de inventatorii săi), este o tehnică de preparare a probelor histologice dezvoltată de o echipă a Universității Stanford Facultatea de Medicină , într-o cercetare multidisciplinară finanțată de Institutele Naționale de Sănătate , condusă de Karl Deisseroth și condusă de o echipă de neurologi, psihiatri, ingineri și informaticieni: K. Chung, S. Kim, KA Zalocusky, JH Mattis, V Gradinaru, S. Kalyanasundaram, SM Pak, C. Ramakrishnan, JJ Mirzabekov, K. Deisseroth. [1]
Ulterior, au fost publicate studii care au folosit metodologia CLARITY pentru a construi hibrizi gel-țesut pe bază de acrilamidă în țesuturi pentru un acces optic mai bun și molecule: printre aceste studii s-au numărat cele pe creierul uman afectat de sindromul Alzheimer [2] , șoarecele spinal cordon [3] , modele animale pentru scleroză multiplă [4] și metode de microscopie, incluzând expansiunea și umflarea țesuturilor pentru utilizare în microscopie confocală [5] și microscopie îmbunătățită a foii de lumină prin tehnica CLARITY ( CLARITY Optimized Light-sheet Microscope , sau COLM) [ 6] .
Tehnică
Tehnica vă permite să îndepărtați complet substratul lipidic prezent în creier înlocuindu-l cu un gel bazat pe diverse componente, inclusiv acrilamidă , bisacrilamidă și formaldehidă . Tehnica permite obținerea, ca rezultat, a transparenței complete în ceea ce privește lumina întregului creier. „Spălarea” reticulului lipidic, opacă la lumină, și înlocuirea acestuia cu un gel transparent, face structurile creierului complet vizibile, păstrându-și totuși integritatea, astfel încât să le putem studia cu un detaliu fără precedent, cu excepția unor biopsii grele [ 7] . Astfel de încercări fuseseră deja făcute în trecut, dar solvenții utilizați au creat probleme în utilizarea tehnicilor de fluorescență utilizate în standard pentru a evidenția celulele și structurile anatomice [7] .
Vizibilitatea structurii permite o cartografiere a creierului până la nivel molecular, permițând cercetătorilor să identifice „unde se găsește un anumit neurotransmițător sau unde este exprimată o anumită genă ” [7] . Ne permite să apreciem structurile mai fine ale țesutului biologic , lăsând nealterate structurile la scară largă, spre deosebire de ceea ce se întâmplă cu tehnicile tradiționale, cum ar fi secționarea creierului în felii foarte subțiri ( microtomie ).
Deși dezvoltată pentru țesuturile cerebrale, tehnica poate fi extinsă la constituenții altor organe ale corpului sau la țesuturile patologice , cum ar fi, de exemplu, țesuturile neoplazice [7] .
Notă
- ^ (EN) Chung K., Kim S., Zalocusky KA, Mattis JH, Gradinaru V., Kalyanasundaram S., și colab., Claritate: Tehnologie pentru imagini cerebrale rapide, întregi, intacte cu fenotipare moleculară , pe abstractsonline.com , 2012.
- ^ Ando Kunie și colab. , În interiorul creierului Alzheimer cu CLARITATE: plăci senile, încurcături neurofibrilare și axoni în 3-D , în Acta Neuropathologica , vol. 128, 2014, pp. 457–459, DOI : 10.1007 / s00401-014-1322-y .
- ^ Zhang M. și colab., Proceedings of the National Academy of Sciences USA , vol. 111, 2014, pp. E1149–58.
- ^ Spence și colab., Aducerea CLARITĂȚII la atrofia substanței cenușii , în Neuroimage , vol. 101, 2014, pp. 625-632, DOI : 10.1016 / j.neuroimage.2014.07.017 .
- ^ (EN) Chen F, Tillberg PW, Boyden ES, Tillberg PW, Boyden ES, Imagistica optică. Microscopie de expansiune , în Știință , vol. 347, nr. 6221, 30 ianuarie 2015, pp. 543-8, DOI : 10.1126 / science.1260088 .
- ^ (EN) Raju Tomer, Li Ye, Brian Hsueh și Karl Deisseroth, Advanced CLARITY pentru imagini rapide și de înaltă rezoluție ale țesuturilor intacte , în Nature Protocols, vol. 9, 2014, p. 1682–1697.
- ^ a b c d Nicola Nosegno , Creierul în transparență , în "PEM-Piazza Enciclopedie Magazine" , Institutul Enciclopediei Italiene Treccani , 11 aprilie 2013. Accesat la 11 noiembrie 2015 (arhivat din original la 1 iunie 2013) .
Bibliografie
- Nicola Nosegno , Creierul în transparență , în „PEM-Piazza Enciclopedie Magazine” , Institutul Enciclopediei Italiene Treccani , 11 aprilie 2013. Accesat la 11 noiembrie 2015 (arhivat de la adresa URL originală la 1 iunie 2013) .
Elemente conexe
linkuri externe
- (EN) Andrew Myers, Getting CLARITY: Procesul de hidrogel dezvoltat la Stanford Creează creier transparent , de pe site-ul Școlii de Medicină a Universității Stanford
