Diagnosticul prenatal

Diagnosticul prenatal este acea ramură a medicinei și în special a obstetricii , care aplică și studiază tehnicile care relevă normalitatea sau prezența diferitelor tipuri de patologii la făt .

Toate tehnicile de diagnostic prenatal sunt efectuate în timpul sarcinii și pot fi invazive sau nu.

Teste invazive

Acestea implică analiza cariotipului celulelor fetale obținute prin diferite tipuri de probe invazive. Scopul este de a evidenția prezența posibilă a bolilor cromozomiale la nivel fetal, dar și a bolilor genetice precum talasemia , fibroza chistică , hemofilia , spina bifida , albinismul , distrofia musculară .

Cariotipul lichidului amniotic este cea mai utilizată tehnică astăzi pentru diagnosticul prenatal invaziv. Lichidul amniotic este retras prin amniocenteză . ^{[ fără sursă ]}

Celulele fetale suspendate în lichidul colectat permit reconstituirea hărții cromozomiale (sau cariotipului) fătului . Cu toate acestea, testele genetice nu sunt capabile să recunoască caracteristicile fizice sau psihologice ale copilului nenăscut date de interacțiunea dintre mai multe gene și mediu. Alte tipuri de analize mai mult sau mai puțin complexe sunt posibile asupra lichidului amniotic și este, de asemenea, posibilă conservarea celulelor stem amniotice .

O altă tehnică implică prelevarea celulelor fetale din vilozitățile corionice prin intermediul villocentezei . De asemenea, în acest caz, celulele sunt cultivate pentru a-și evidenția normalitatea, dar acestea sunt celule preluate din afara camerei gestaționale ( vilozități corionice ).

În ambele cazuri cariotipul poate fi realizat prin tehnica tradițională sau prin tehnica comparativă de hibridizare genomică pe microarray ( Array CGH ), care, având în vedere sensibilitatea mai mare, permite evidențierea unui număr mai mare de anomalii cromozomiale.

Teste neinvazive

Cele exprimate la punctul „examinări invazive” sunt două tehnici invazive (lichidul este luat prin puncție în ambele cazuri), dar există și tehnici non-invazive. Dezvoltarea ultrasunetelor, de exemplu, a făcut posibilă dezvoltarea unor tehnici de diagnostic cu sensibilitate ridicată, în primul trimestru, cum ar fi testul combinat (bitest + translucență nucală), testul „cvadruplu” și recent testul sca (unic) dispozitiv "înregistrat la Ministerul Sănătății), în al doilea trimestru, totul pe baza măsurării cu ultrasunete a parametrilor anatomici și funcționali ai fătului și pe rezultatul testelor de chimie a sângelui. Aceste teste sunt teste de screening , deci nu dau un anumit răspuns, dar au o valoare statistică (foarte precisă) care poate duce la teste de diagnostic.

Metodele de diagnostic prenatal pot include, de asemenea, ecografia celui de-al doilea trimestru de sarcină (numită și ecografie morfologică ), care poate evidenția orice malformații sau anomalii fetale și ecocardiografia fetală care analizează (întotdeauna cu ultrasunete) inima fătului nu numai din punct de vedere anatomic, ci și din punct de vedere dinamic-funcțional. Această tehnică nu poate depista boli genetice.

O nouă tehnică dezvoltată de un grup de cercetători susținută financiar de Institutul Național de Sănătate utilizează ultrasunete pentru a monitoriza placenta și posibila alterare a fluxului sanguin fetal la începutul sarcinii ^[1] .

Recent, a fost propus un test extrem de sensibil pentru cele mai frecvente aneuploidii care caută și analizează ADN-ul fetal liber care circulă în plasma maternă, cunoscut în mod obișnuit ca NIPT (test prenatal non-invaziv).

NIPT se bazează pe numărul de fragmente ale cromozomilor de interes (21 în cazul sindromului Down) prezente în sângele matern. Deși nu este inclus în testele diagnostice, dar probabilistice, testul este de departe cel mai precis disponibil până acum, cu valori care sunt mai mari de 99,99% sensibilitate pentru trisomia 21 și mai puțin de 0,2% fals-pozitive. ^{[ fără sursă ]}

În prezent, în Italia există 3 tipuri de teste prenatale neinvazive de generație recentă.

Distincția acestor teste efectuate pe baze tehnologice ia în considerare 2 parametri:

1. Metoda utilizată pentru secvențierea / alinierea secvențelor.
2. Metoda de numărare a cantității de ADN. Deoarece este posibil să se detecteze aneuploidii cromozomiale în funcție de cantitatea de ADN detectată.

Conform primului parametru, este posibil să se facă distincția între acele teste care utilizează o secvențiere masivă paralelă - MPS (secvențierea pistolului cu genom întreg) și cele care utilizează o secvențiere țintită (secvențierea țintită). Pe baza celui de-al doilea, în schimb, distingem testele care efectuează numărarea tuturor secvențelor produse și cele care efectuează în schimb un număr al anumitor polimorfisme nucleotidice unice (SNP).

Testele care utilizează metoda MPS combinate cu numărul tuturor secvențelor sunt:

• Testul FetalDNA : efectuat integral la laboratoarele Altamedica (Roma - Italia), test de screening prenatal neinvaziv care implică analiza ADN-ului fetal liber care circulă pe sângele matern, utilizând tehnologia Thermo Fisher Scientific NGS în sinergie cu tehnica de amplificare dPCR (l 'întreg fluxul de lucru este CE / IVD validat cu o Bioinformatică proprietară).
• Aurora : realizată de laboratoarele Illumina Inc. (SUA) și distribuită în Italia de Sorgente Genetica srl (Italia).
• Test IONA : efectuat în laboratoare certificate Premaitha (Manchester - Marea Britanie), este certificat CE-IVD de unul dintre numeroasele „organisme notificate” exclusiv pentru pregătirea bibliotecii și este distribuit de Labospace srl (Italia).
• G-test : efectuat la Universitatea din Roma Tor Vergata și distribuit de Institutul Bioscience (RSM).
• MaterniT21 Plus : interpretat de Sequenom (SUA) și Praenatest de Lifecodexx (Germania).
• PrenatalSafe : efectuat de Genoma Group (Italia), testul detectează cele mai frecvente aneuploidii fetale utilizând platformele de secvențiere Illumina de ultimă generație.
• Liniște: efectuată în Europa de Genoma Swiss Biotechnology (Elveția).
• Vera Prenatal Test : efectuat de Ames Instrumental Polydiagnostic Center (Italia), partener al Verinata-Illumina (SUA) care efectuează testul Verifi (similar cu Vera Prenatal Test ). Vera Prenatal Test este certificat CE / IVD pe fluxul de lucru complet: de la extracția CFDNA, pregătirea bibliotecii, secvențierea până la raportare
• Vera + Plus : efectuat de Centrul Poliagnostic Instrumental Ames (Napoli), testul detectează aneuploidie și modificări structurale care afectează fiecare cromozom al cariotipului fetal. Chiar dacă aceste investigații nu sunt recunoscute de societățile științifice internaționale.
• Nativ: efectuat de BioRep Srl, o companie a grupului Sapio (Italia), care efectuează testul VeriSeq NIPT Solution V2 de către tehnologiile Illumina Inc. Nativa este singurul test certificat CE / IVD pentru fluxul de lucru complet: de la extracția CFDNA, la pregătirea bibliotecii, secvențierea și raportarea .

Teste care utilizează secvențierea țintită, împreună cu enumerarea anumitor SNP:

• Panorama : interpretată de Natera (SUA) și comercializată în Italia de Geneticlab.

Teste folosind tehnologia Affimetryx Array (fără secvențiere):

• Test prenatal Harmony : efectuat de Ariosa (SUA) și Toma (Italia). Comercializat în Italia de Archimed, Synlab, Cam, Toma (și prin Matherna).

Există, de asemenea, teste testate în numeroase laboratoare. În special, spitalul Pavia, spitalul Sant'Anna din Torino, printr-un nou test de imunofluorescență propus de Vanadis și distribuit de Perkin Elmer și alte centre private.

Pentru alegerea dintre aceste teste, este bine să vă bazați pe sfatul unui medic specialist, care este, de asemenea, capabil să explice diferențele dintre aceste teste (un genetician sau, alternativ, și propriul dvs. ginecolog este bine). Deoarece acestea sunt tehnologii absolut avansate, acestea sunt disponibile la un preț important, deci factorul economic își are ponderea. Cu toate acestea, aceste teste nu sunt întotdeauna aceleași în ceea ce privește versatilitatea și rezultatul, de aceea este posibil să alegeți și în funcție de alți parametri, de exemplu:

• Cazurile de validare raportate în publicațiile științifice, care, în plus, pot furniza alte informații utile printre următoarele.
• Incidența falselor negative (rezultat negativ pentru făturile patologice de fapt), a falsurilor pozitive (rezultat pozitiv pentru făturile sănătoase).
• Momentul pentru rezultatul testului.
• Fiabilitatea testului la prima eșantionare (sau invers, incidența necesității re-eșantionării).
• Dacă, pe lângă trisomiile principale (cromozomii 13, 18 și 21), aceștia caută pe cromozomii sexuali și pe alte perechi de cromozomi. Chiar dacă aceste investigații nu sunt recunoscute de societățile științifice internaționale.
• Dacă testul oferă posibilitatea de a analiza, de asemenea, posibile microdelecții cromozomiale. Chiar dacă aceste investigații nu sunt recunoscute de societățile științifice internaționale.
• Dacă este necesară și o probă de la tată pentru testare.
• Diverse servicii oferite de cei care comercializează testul, cum ar fi consilierea genetică, oferta gratuită a unui invaziv în cazul unui test cu rezultat patologic (cariotip clasic, Array CGH), garanțiile oferite în caz de rezultate discordante etc. .
• Apoi, există mai mulți parametri tehnici pe care este posibil să se bazeze alegerea:

Anumite teste măsoară cu exactitate fracția fetală (adică procentul de ADN fetal care circulă liber în plasma maternă), deși unele teste nu raportează aceste date. Testele care utilizează metoda de secvențiere vizată trebuie să măsoare acest parametru, deoarece este utilizat pentru a calcula o statistică de risc, care constă în rezultatul testului. Testele care implică metoda MPS, pe de altă parte, nu trebuie să cuantifice fracția fetală, deoarece utilizează numărul de secvențe fetale evaluate efectiv ca parametru limitativ. Cu toate acestea, este o idee bună ca acest parametru să fie măsurat.

În cele din urmă, anumite sarcini au condiții speciale pentru care unele teste nu pot fi luate în considerare, de exemplu sarcini gemene sau cazuri în care sarcina are loc după o donare de ovule.

Este important de reținut că, de fapt, nu există nicio răspundere civilă pentru clinician în cazul în care acesta prescrie un test de screening prenatal menit să constate riscul trisomiei fetale. De fapt, deoarece este un test de screening și nu unul de diagnostic, rezultatul nu este sigur prin definiție . De fapt, în testele disponibile este întotdeauna bine raportat, într-o formă explicită și reiterată, în consimțămintele informate, că rezultatul, care trebuie considerat „diagnostic”, trebuie validat atât în ​​cazul pozitivității, cât și al negativității printr-un sistem invaziv. diagnostic prenatal (villocenteza sau amniocenteza). Prin urmare, eșecul efectuării testului de confirmare a diagnosticului îl dezincriminează în totalitate pe medic de responsabilitatea unui screening care nu respectă diagnosticul. Cu toate acestea, este esențial ca medicul să fi informat corect părinții cu privire la diferența dintre screening (falibil) și diagnostic (sigur) și să fi semnat acceptarea limitelor screeningului în consimțământul informat.

De fapt, jurisprudența actuală s-a concentrat pe responsabilitatea medicului care efectuează testele de diagnostic prenatal, nu pe corectitudinea diagnosticului testului sau pe nerespectarea regulilor deontologice (diferite tipuri de teste mai mult sau mai puțin recunoscute ca valabile) , dar consideră că plângerile sunt bine întemeiate. atât în ​​ceea ce privește încălcarea legii (articolele 1218 și 2236 din codul civil), cât mai degrabă și mai ales cu referire la obligațiile de informare cu privire la potențialul testului indicat, aceste obligații sunt care revine personalului medical în virtutea contractului stipulat cu pacientul. Responsabilitatea pentru neprezentarea informațiilor de către medic cu privire la testele de diagnostic prenatale mai eficiente (a se vedea: Casarea civilă, secțiunea III , sentința 11 mai 2009, nr. 10741;. Casarea civilă III. Hotărârea 10 ianuarie - 2 octombrie 2012 , nr . 16754 .; Curtea Supremă de Casație secțiunea III sentința 27 noiembrie 2015, nr. 24220 )

În ceea ce privește marcajul CE-IVD, referitor la dispozitivele de diagnostic in vitro, acesta afirmă literalmente că „ dispozitivele pot fi introduse pe piață și / sau puse în funcțiune numai dacă îndeplinesc cerințele stabilite în directiva comunitară ” (98 / 79 / CE). Aceasta a fost apoi modificată, pentru clarificări formale, prin 2007/47 / CE. Recent, Regulamentul (UE) 2017/746 al Parlamentului European și al Consiliului din 5 aprilie 2017, referitor la dispozitivele medicale de diagnostic in vitro, abrogă progresiv Directiva 98/79 / CE (încă în vigoare astăzi) și decizia 2010/227 / UE a Comisiei și le înlocuiește complet până în 2023 ..

Prin urmare, testele utilizate trebuie să îndeplinească cerințele prescrise. Practic toate testele disponibile astăzi declară „ declarația de conformitate ” completă, un document intern sau, mai bine întocmit, întocmit de un organism privat extern numit organism notificat, care certifică, sub propria răspundere, că un test specific sau o etapă de diagnostic este conformă cu dispozițiile directivei comunitare 98/79 la punctul 2 face referință la anexa 8. Exact acolo unde prezenta directivă prevede: Producătorul sau reprezentantul său autorizat (organism certificat) întocmește, pentru dispozitivele destinate evaluării performanței, o declarație care conține informațiile menționate la punctul 2 și asigurați-vă că dispozițiile relevante ale prezentei directive sunt respectate .

Directivele europene sunt valabile pentru toate testele de diagnostic in vitro și, evident, nu fac nicio mențiune specifică asupra testelor de screening pentru diagnosticul prenatal, prin urmare, declarațiile de conformitate nu trebuie să acopere întregul flux de lucru, ci doar părți specifice ale acestuia. , cum ar fi pregătirea „bibliotecilor” sau software-ul utilizat (vezi Illumina Inc.). Cu toate acestea, unele laboratoare, chiar dacă nu sunt solicitate, comandă acum organismului notificat ales certificarea întregului flux de lucru producând, în documentul final, diferitele certificări ale etapelor analitice ulterioare.

Elemente conexe

• Amniocenteza
• Villocenteza
• Eugenie
• FIV
• Translocație (cromozom)
• Neurofibromatoza
• Dezvoltarea prenatală umană

Notă

linkuri externe

• ( EN ) Diagnostic prenatal / Diagnostic prenatal (altă versiune) , în Encyclopedia Britannica , Encyclopædia Britannica, Inc.

Portal Medicină : accesați intrările Wikipedia care se ocupă de medicină