Anticorp monoclonal

Schema generală a hibridomului pentru producerea de anticorpi monoclonali

Anticorpii monoclonali ( MAb , Monoclonal AntiBody ) sunt proteine fabricate în laborator care imită capacitatea sistemului imunitar de a lupta împotriva virușilor. Sunt anticorpi identici, produși de linii celulare derivate dintr-un singur tip de celulă imună, adică o clonă celulară . Prin urmare, diferă de anticorpii policlonali .

Având în vedere orice antigen , este posibil să se creeze unul sau mai mulți anticorpi monoclonali capabili să lege în mod specific unul dintre factorii săi antigenici ; aceasta implică posibilitatea identificării, neutralizării sau purificării substanței în cauză.

Această caracteristică importantă a anticorpilor monoclonali îi face un instrument extrem de eficient în biochimie , biologie moleculară și medicină .

Producție

Fiecare anticorp care recunoaște un determinant antigenic specific este produs de un limfocit B specific. Izolarea in vitro și cultura unei celule capabile să producă un singur anticorp este sursa anticorpilor monoclonali monospecifici. Cu toate acestea, limfocitele B, cultivate in vitro, mor după un timp foarte scurt și, prin urmare, nu pot fi o sursă pentru producerea pe termen lung de anticorpi.

Tehnologia anticorpilor monoclonali include izolarea acestor limfocite B și fuziunea lor ulterioară cu celule transformate ( celule de mielom ), utile pentru caracteristicile lor de creștere și supraviețuire crescute. Multe dintre celulele hibride rezultate (sau hibridomi ), care sunt cultivate in vitro, vor păstra capacitatea de a trăi mai mult timp, precum și produc cantități mari de anticorp monospecific.

Fuziunea dintre limfocitele B din splină și ganglionii limfatici ai unui animal imunizat și mielomul de șoarece (cel mai frecvent utilizat animal), se realizează prin intervenția unui promotor de fuziune a membranei, cum ar fi polietilen glicol .

Mediul pe care sunt crescuți hibrizii este de tip selectiv cunoscut sub numele de HAT ( Hipoxantină-Aminopterin-Timidină ), care datorită compoziției sale inhibă creșterea atât a mieloamelor, cât și a celulelor splinei nefuzionate, dar nu și a hibridomului , care completează cele două liniile parentale.

Hibridomele sunt separate de tip în godeurile unei plăci de micro -test și sunt ulterior testate prin ELISA indirectă necompetitivă pentru a le identifica pe cele care sintetizează anticorpul dorit. Hibridomele astfel selectate pot fi propagate in vitro și / sau conservate în azot lichid pentru utilizare ulterioară.