Testul micronucleului
Testul micronucleului este un test de mutageneză care vă permite să observați orice erori care au apărut în timpul mitozei , cauzate de mutageni .
Acesta constă în prelevarea, dintr-un organism supus agentului mutagen, de celule în timpul mitozei și observarea unui număr rezonabil (cel puțin o sută) la microscop, după efectuarea unei colorări diferențiale care evidențiază materialul genetic: în caz de erori (cauzată de mutagen), pe lângă nucleu , fragmente de ADN împrăștiate în jurul citoplasmei sunt vizibile și, prin urmare, nu au fost încorporate în nucleul principal în ultimele etape ale diviziunii celulare (numite micronuclei ). Aceste modificări, care apar ca nuclee accesorii mici, sunt morfologic identice cu cele normale; prin urmare perfect rotund, dar considerabil redus ca dimensiune. De fapt, pentru a fi considerate micronucleii reali, în general nu trebuie să depășească o treime din dimensiunea nucleului principal.
Prin efectuarea unei analize statistice a rezultatelor obținute (comparându-le cu un control alcătuit dintr-un organism care nu este supus mutagenului) este posibil să se determine efectul substanței mutagene, deducând astfel dacă substanța studiată este clastogenă sau aneuploidizantă substanţă. Pentru o evaluare inițială, indirectă imunofluorescentă tehnica este utilizată, adică un anticorp kinetocor anticorp este folosit, care leagă proteinele din centromere, la care anticorpul secundar, care poartă fluorocromul , apoi va lega. Efectul tehnicii menționate mai sus constă într-o fluorescență, din care se înțelege, dacă micronucleul conține centromerul (și, prin urmare, este indicat ca K +), sau fără un centromer și, prin urmare, considerat K- (unde prin K înțelegem Krest și pozitivitatea relativă sau negativitatea rezultatului testului). O regulă maximă ne permite să spunem că, odată ce testul a fost efectuat, micronucleele sunt numărate; calculați procentajul raportat la numărul total de celule; dacă 70% sau puțin mai mult sunt K +, substanța este aneuploidizantă , invers, va fi clastogenă .
