Fracționarea plasmatică
Fracționarea plasmatică se referă la procesele generale de separare a diferitelor componente ale plasmei sanguine , o componentă a sângelui obținută prin fracționarea sângelui , pentru a obține derivați plasmatici .
Plasma conține o mare varietate de proteine, inclusiv albumina , imunoglobuline și factori de coagulare, cum ar fi fibrinogenul . [1] Multe dintre proteinele din plasmă au utilizări terapeutice importante: [1] Albumina este utilizată în mod obișnuit pentru completarea și menținerea volumului de sânge după leziuni traumatice, în timpul intervenției chirurgicale și în timpul schimbului de plasmă . [2]
Albumina constituie aproximativ 60% din totalul proteinelor plasmatice și este prezentă la concentrații cuprinse între 35 și 55 mg / ml; [3] este în principal responsabil pentru presiunea osmotică a sângelui și funcționează ca un transportor de molecule cu solubilitate scăzută în apă, cum ar fi hormoni solubili în grăsimi , enzime , acizi grași , ioni metalici și medicamente . [2]
Derivații plasmatici
| Componenta | Indicații |
|---|---|
| Antitrombina III | Deficitul congenital |
| Concentratul complexului de protrombină | Supradozaj de anticoagulante |
| Inhibitor C1 | Angioedem ereditar |
| Factorul VIII | Hemofilie A |
| Factorul IX | Hemofilie B |
| Factorul X | Deficitul congenital |
| Factorul XIII | Deficitul congenital |
| Fibrinogen | Deficitul congenital Sângerări masive |
| Imunoglobuline | Imunoprofilaxie |
| Albumină | Hipoalbuminemie Restabilirea volumului (traume, arsuri , intervenții chirurgicale) |
| Alfa 1-antitripsina | Deficitul congenital |
Tehnici de fracționare
Când scopul final al procesării plasmei este de a obține o componentă plasmatică pentru injecție sau transfuzie, această componentă trebuie să fie foarte pură.
Prima metodă practică la scară largă pentru fracționarea plasmei sanguine a fost dezvoltată de Edwin J. Cohn în timpul celui de-al doilea război mondial și este cunoscută sub numele de procesul Cohn sau fracționarea etanolului rece, deoarece implică o adăugare treptată la soluția de etanol la 5 ° C și 3 ° C. [2] Procesul Cohn exploatează diferențele în proprietățile diferitelor proteine plasmatice, în special solubilitatea ridicată și punctul izoelectric scăzut al albuminei. Deoarece concentrația de etanol este crescută treptat de la 0% la 40%, pH-ul este redus de la neutru (aproximativ 7) la aproximativ 4,8, în apropierea punctului izoelectric al albuminei.
În fiecare etapă, unele proteine sunt precipitate și îndepărtate; precipitatul final este albumina purificată.
Există mai multe variante ale acestui proces, inclusiv o metodă adaptată de Nitschmann și Kistler care folosește mai puține etape și înlocuiește centrifugarea și înghețarea cu filtrare și diafiltrare . [1] [2]
Unele metode noi de purificare a albuminei adaugă etape de purificare suplimentare procesului Cohn și variațiilor sale, în timp ce altele încorporează cromatografia . [2] Prelucrarea cromatografică a albuminei ca alternativă la procesul Cohn a apărut la începutul anilor 1980, însă nu a fost adoptată pe scară largă de mult timp din cauza disponibilității inadecvate a echipamentelor de cromatografie pe scară largă. [2] Metodele care includ cromatografia începe în general cu plasma cryodepleted supus tampon de schimb diafiltrare sau tampon cromatografie de schimb pentru a prepara plasma pentru ulterioare cromatografia de schimb ionic etape. După schimbul de ioni există în general alte etape de purificare cromatografică și schimb de tampon . [2]
Notă
- ^ a b c T. Brodniewicz-Proba, Fracționarea plasmei umane și impactul noilor tehnologii asupra utilizării și calității produselor derivate din plasmă , în Blood Reviews , vol. 5, nr. 4, 1991-12, pp. 245–257, DOI : 10.1016 / 0268-960x (91) 90016-6 . Adus la 6 mai 2020 .
- ^ a b c d e f g P. Matejtschuk, CH Dash și EW Gascoigne, Producția soluției de albumină umană: un coloid în continuă dezvoltare , în British Journal of Anesthesia , vol. 85, nr. 6, 2000-12, pp. 887–895, DOI : 10.1093 / bja / 85.6.887 . Adus la 6 mai 2020 .
- ^ Yufeng Shen, Jon M. Jacobs și David G. Camp, Ultra-High-Efficiency Strong Cation Exchange LC / RPLC / MS / MS for High Dynamic Range Characterization of the Human Plasma Proteome , în Chimie Analitică , vol. 76, nr. 4, 2004-02, pp. 1134–1144, DOI : 10.1021 / ac034869m . Adus la 6 mai 2020 .